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土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 天津本生

點擊次數:142  發布時間:2023/2/21 11:09:25

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公司名稱:本生(天津)健康科技有限公司 型 號: 生產地址:中國大陸 已獲點擊:142 簡單介紹: 土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 天津本生本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。
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  土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 天津本生

  中文名稱:土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒

  儲存條件2-8℃

  單位盒

  有效期6個月

  英文名稱Soil Acid Protease Activity Assay Kit

  檢測方法可見分光光度法 Spectrophotometer

  規格50T/24S

  產品組成:使用請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

  試劑名稱 規格 保存條件

  試劑一 液體 20 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑二 粉劑×1 瓶 2-8°C保存

  試劑三 液體 12 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑四 液體 40 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑五 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑六 液體 15 mL×1 瓶 2-8°C保存

  標準品 液體 1 mL×1 支 2-8°C保存

  溶液的配制:

  1、 試劑二:臨用加入 10 mL 試劑六,沸水浴攪拌溶解后待用,用不完的試劑 2-8°C保存 1 個月。

  2、 標準品:20μmol/mL 酪氨酸溶液。

  產品說明:

  土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源。土壤酸性蛋白酶在酸性環境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。酸性條件下,土壤酸性蛋白酶可將酪蛋白水解產生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍,在680nm有特征吸收峰。

  Casein Tyrosine Phosphomolybdic acid + Tyrosine Tungsten blue 680nm

  注意:實驗之建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者

  增加樣本量進行檢測。

  需自備的儀器和用品:

  可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、臺式離心機、研缽、蒸餾水、30-50

  目篩。

  操作步驟:

  一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)新鮮土樣自然風干或 37°C烘箱風干,過 30~50 目篩。

  二、測定步驟

  Soil acid protease,H+OH-

  1、 分光光度計預熱30min 以上,調節波長至680nm,蒸餾水調零。

  2、 標準溶液的稀釋:取10μL 20μmol/mL酪氨酸標準液,加入990μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.2μmol/mL標準液使用,現用現配。(實驗中每管需要220μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)

  3、 樣本測定

  試劑名稱 測定管 對照管 標準管 空白管

  風干土樣(g) 0.1 0.1 - -

  試劑一(μL) 200 200 - -

  試劑二(μL) 100 - -

  充分混勻后,37°C水浴/恒溫培養箱中反應24h,期間振蕩5-6 次,

  使土樣與反應液充分接觸。 - -

  試劑三(μL) 200 200 - -

  試劑二(μL) - 100 - -

  混勻,10000rpm 室溫離心10min,取上清液待測 - -上清液(μL) 220 220 - -

  0.2μmol/mL標準液(μL) - - 220 -

  蒸餾水(μL) - - - 220

  試劑四(μL) 650 650 650 650

  試劑五(μL) 130 130 130 130

  混勻,40°C水浴或恒溫培養箱培養 10min,10000rpm 室溫離心 10min,取上清液于 680nm 下讀取各管吸光值 A,分別記為 A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,ΔA標準=A 標準管-A 空白管。(標準管、空白管只需測 1-2 次,每個測定管需設一個對照管)

  三、土壤酸性蛋白酶活性計算

  單位定義:每天每g土樣中產生1μmol的酪氨酸為一個土壤酸性蛋白酶活力單位。

  土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)=C標準×ΔA測定÷ΔA標準×V反總÷W÷T=0.1×ΔA測定÷ΔA標準÷W

  C標準:標準管濃度,0.2μmol/mL;V反總:反應體系總體積,0.5mL;T:反應時間,1d;W:樣本質量,g。

  注意事項:

  當吸光值大于1時,建議將上清液用蒸餾水稀釋后進行測定,計算時注意乘以稀釋倍數。

  實驗實例:

  1、 分別稱取 2 份 0.1g 土樣于 1.5mLEP 管中,分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作,使用 1mL 玻璃比色皿 測 定 吸 光 度 , 計 算 ΔA 測 定 =A 測 定 管 -A 對 照 管 =0.206-0.178=0.028 , ΔA 標 準 =A 標 準 管 -A 空 白 管=0.540-0.028=0.512,按土壤質量計算酶活得:

  土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W= 0.1×0.028÷0.512÷0.1= 0.0547U/g 土樣。

  2、 分別稱取 2 份 0.1g 三葉草土樣于 1.5mLEP 管中,分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作,使用 1mL 玻璃比色皿測定吸光度,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管=0.831-0.612=0.219,ΔA 標準=A 標準管-A 空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤質量計算酶活得:

  土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W= 0.1×0.219÷0.512÷0.1=0.0313 U/g 土樣。

  相關系列產品:

  BC0270/BC0275 土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒

  BC0880/BC0885 土壤堿性蛋白酶(S-ALPT)活性檢測試劑盒

  測定意義:土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源。S-ACPT 在酸性環境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。

  測定原理:酸性條件下,S-ACPT 可將酪蛋白水解產生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm 有特征吸收峰。

  所需儀器及設備:可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。

  備注:

  以上數據均來自公開文獻, 暫未進行獨立驗證, 僅供參考。

  土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 本生生物公司供應:熒光定量PCR耗材,細胞培養類,核酸提取耗材,試劑包裝類,生物試劑,色素,原料,抗原抗體,試劑盒等,通用耗材包括深孔板、96孔硅膠墊、吸頭、封板膜、玻片、試管、量杯、試劑槽、離心管、移液器等。

更新時間:2024/3/28 16:46:50


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